產細菌素芽孢桿菌的篩選及性質研究

產細菌素芽孢桿菌的篩選及性質研究

作者:師大云端圖書館 時間:2019-06-28 分類:碩士論文 喜歡:544
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【摘要】芽孢桿菌在自然界分布非常廣泛,多數芽孢桿菌的抗菌物質具有抗菌譜廣,對酸堿度要求不高,熱穩定性好,易于進行分子加工等特點。這些都為開發新型天然防腐劑以及生防制劑提供了很好的條件。本文從發酵食品中篩選出一株抗菌活性高、抗菌譜廣的芽孢桿菌,并對菌株及其產生的抗菌物質進行了鑒定。通過對分離菌株菌落形態和個體形態的觀察及一系列生理生化試驗,可初步鑒定為枯草芽孢桿菌,暫命名為B.C119。B.C119具有廣譜抗菌作用,對革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌、酵母菌、霉菌都有一定的拮抗作用,其中對細菌作用最為明顯。培養基的組成和培養條件對枯草芽孢桿菌B.C119的生長及細菌素的產生有很大的影響。通過實驗得到優化后的最佳培養基是:葡萄糖0.5%,蛋白胨1%,牛肉膏0.3%;最佳培養條件為:溫度37℃,初始pH6.5,種齡6h,接種量2%,溶氧量75mL/250mL,培養時間24h。另外生長曲線及抗菌活性曲線表明細菌素在發酵2h以后就開始產生,20h抑菌活性達到最大值,36h后抑菌活性下降,即細菌素的大量積累始于對數期末期。通過硫酸銨鹽析實驗,確定采用飽和濃度為25%的硫酸銨就能把B.C119發酵液中的大部分抗菌物質沉淀出來。對分離出的B.C119細菌素的性質研究表明,此細菌素具有較好的熱穩定性和酸堿穩定性,在30℃、40℃…100℃下分別處理30min、1h和2h,其中80℃處理1h抑菌活性下降9%,100℃處理2h抑菌活性下降最明顯為25%。在pH4-10的范圍內抑菌活性基本沒有變化,pH小于4時最大下降率為27%,pH大于11時最大下降率為18%。有機溶劑的處理對B.C119細菌素的抗菌活性有一定的影響,經過甲醇、乙醇、正丁醇和氯仿處理的透析液的抑菌活性分別下降了56.5%、40%、45.5%和30%。經過胃蛋白酶、胰蛋白酶和木瓜蛋白酶處理的透析液的抑菌活性分別下降了48%、40%和28%,抗菌物質損失較大,這一結果更加證實了細菌素的蛋白質性質。B.C119的發酵液經過離心、濃縮、沉淀和透析一系列處理后得到B.C119抗菌物質的粗提液,經SephadexG-50分離后,得到2個蛋白洗脫峰,抑菌活性測定發現只有第二個洗脫峰具有抗菌活性,并且洗脫峰與抗菌活性具有一致性。
【作者】陳雪;
【導師】侯紅漫;
【作者基本信息】大連工業大學,食品科學,2008,碩士
【關鍵詞】芽孢桿菌;細菌素;條件優化;性質研究;

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